Unterschied zwischen YAC und M13 Phage Vector
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Hauptunterschied - YAC gegen M13 Phage Vector
DNA-Klonierung ist ein wichtiger Prozess, der die Ausbreitung wichtiger DNA-Fragmente von Organismen ermöglicht. Es erfordert die Verbindung spezifischer DNA mit Vektor-DNA, um rekombinante DNA zu erzeugen, die sich in den Wirtsorganismus umwandelt. Ein Vektor ist ein DNA-Molekül, das sich als Vehikel verhält, um fremdes genetisches Material in eine andere Zelle oder einen anderen Organismus zu transportieren. Es sollte in der Lage sein, innerhalb des Wirtsorganismus zu replizieren und mehrere Kopien rekombinanter DNA herzustellen. Beim DNA-Klonieren werden verschiedene Arten von Vektoren verwendet. Künstliches Hefechromosom (YAC) und der M13-Phagenvektor sind zwei Arten von ihnen. Der Hauptunterschied zwischen YAC- und M13-Phagenvektor ist der YAC ist ein künstliches Chromosom, das sich in Hefezellen repliziert während Der M13-Phagenvektor ist eine einzelsträngige zirkuläre DNA des Bakteriophagen M13, die sich in repliziert E coli Zellen.
INHALT
1. Übersicht und Schlüsseldifferenz
2. Was ist YAC?
3. Was ist M13 Phage Vector?
4. Side-by-Side-Vergleich - YAC und M13 Phage Vector
5. Zusammenfassung
Was ist ein YAC-Vektor??
YAC ist ein künstlich gebautes Chromosom, das die Fähigkeit besitzt, ein großes Segment fremder DNA zu tragen und sich innerhalb der Hefezellen zu replizieren. Es besitzt Zentromere, Telomere und autonom replizierende Sequenzen, die für die Replikation und Stabilität wesentlich sind. YAC sollte auch einen selektiven Marker oder Marker und Restriktionsstellen tragen, um es zu einem effektiven Klonierungsvektor zu machen. Große Sequenzen im Bereich von 1000 kb bis 2000 kb können in YAC inseriert und in Hefe übertragen werden.
Abbildung 01: YAC-Vektor
Was ist M13 Phage Vector??
Bacteriophage M13 ist ein Virus, das infiziert und sich darin vermehrt E coli. Das Genom des M13-Bakteriophagen ist klein und beträgt etwa 6,7 kb. Es ist eine einzelsträngige, zirkuläre und positive Sense-DNA. Dieses Virus infiziert spezifisch E coli Bakterien durch F pilus. Sobald es die ssDNA in das Bakterium eingibt, synthetisiert es seinen komplementären Strang und wird zu dsDNA oder der replikativen Form (RF) von M13. RF kann sich wie ein Plasmid im Wirtsorganismus verhalten. Die dsDNA repliziert innerhalb E coli und produziert ssDNA mit neuen Phagen. Diese neuen Phagen werden kontinuierlich aus dem E coli ohne die Wirtszelle zu töten. Die Infektion verlangsamt jedoch das Wachstum von E-Coli. dsDNA kann aus Bakterienzellen extrahiert und als Vektoren bei der DNA-Klonierung verwendet werden. Sie sind als M13-Phagenvektoren bekannt. Sie können leicht manipuliert und ähnlich wie Plasmidvektoren verwendet werden.
Die inhärente Infektionsfähigkeit dieser M13-Phagen ist eine gute Voraussetzung, um als Vektor beim Genklonieren verwendet zu werden. Bei der Entwicklung von M13 zu einem Vektor sollten mehrere Elemente in sein Genom eingebaut werden. Sie sind ein Gen für das lac-Repressor (lac I) -Protein, die Operator-proximale Region des lac Z Gen, ein lac-Promotor und eine multiple Klonierungsstelle (Polylinker). Wenn dsDNA des M13 als Vektoren verwendet wird, kann es als Plasmidvektor behandelt werden. Die Verwendung von ssDNA M13 hat jedoch Vorteile bei der DNA-Sequenzierung und der ortsgerichteten Mutagenese.
Da der M13-Phagenvektor mehrere Klonierungsstellen in trägt lacZ In dieser Region können rekombinierte Vektoren leicht durch das Screening blau / weißer Kolonien auf Agarplatten identifiziert werden, die IPTG und X-Gal enthalten. Auf den Platten erzeugte blaue Plaques enthalten die rekombinierten Phagen nicht. Daher können Phagen mit Inserts für das Klonen ausgewählt werden.
Abbildung 02: Bakteriophage M13
Was ist der Unterschied zwischen YAC und M13 Phage Vector??
YAC gegen M13-Phagenvektor | |
| YAC ist ein gentechnisch hergestelltes Chromosom, das die Fähigkeit besitzt, einen großen Teil fremder DNA zu transportieren und sich innerhalb der Hefezellen zu replizieren. | Der M13-Phagenvektor ist ein viraler Vektor, der vom Bakteriophagen M13 entwickelt wurde und in den fremde DNA inseriert wird E coli. |
| Zweck | |
| YACs wurden entworfen, um große Fragmente genomischer DNA in Hefe zu klonen. | M13-Phagenvektoren werden verwendet, um Fremd-DNA in einzufügen E coli. |
| Länge einfügen | |
| YACs können genomische Inserts in Megabasis enthalten (1000 kb - 2000 kb). | Die Größe der Inserts beträgt etwa 1.500 bps. |
| Konstruktion | |
| YAC-DNA ist schwer intakt zu reinigen und erfordert eine hohe Konzentration zur Erzeugung des YAC-Vektorsystems. | Es erfolgt über eine zyklische photosynthetische Elektronenkette. |
| Stabilität | |
| YAC ist instabil. | M13-Phagen können leicht extrahiert werden. |
| Größe | |
| Enzyme sind größere Moleküle. | M13-Phagen sind stabiler als YAC. |
Zusammenfassung - YAC vs M13 Phage Vector
YAC ist ein künstlich aufgebautes Vektorsystem, das eine spezifische Region des Hefechromosoms verwendet, um große Segmente genetischen Materials in Hefezellen einzuführen. Der M13-Phagenvektor ist ein Vektorsystem, das von dem Bakteriophagen M13 stammt, der verwendet wird E coli als Wirtsorganismus. Dies ist der Hauptunterschied zwischen YAC und M13 Phage Vector. Beide sind gleichermaßen für die rekombinante DNA-Technologie und das Klonen von Genen von Nutzen.
Referenz:
1. "Vektor". Genetik-Hinweise - Vektor. N.p., n. D. Netz. 16 Mai 2017. https://genetics-notes.wikispaces.com/Vector
2. "Künstliches Chromosom der Hefe". Wikipedia. Wikimedia Foundation, 21. April 2017. Web. 16 Mai 2017. .
Bildhöflichkeit:
1. “M13B” von J3D3 - Eigene Arbeit (CC BY-SA 3.0) über Commons Wikimedia
